童年的一起突發事件,令彼得·帕克(安德魯·加菲爾德 Andrew Garfield 飾)和父母生離死別。轉眼彼得成為一名高中生,他偶然發現父親的公文包,並從叔父本(馬丁·辛 Martin Sheen 飾)處得到線索,於是啟程前往奧斯庫公司拜訪父親當年的合作夥伴——科特·康納斯博士(瑞斯·伊凡斯 Rhys Ifans 飾)。在公司內四處尋找線索的彼得意外被蜘蛛咬了一口,回程途中他的身體發生奇異的變化。在康納斯博士德引導下,彼得不斷了解並發掘體內著超乎尋常的能力,喜怒哀樂,各種意想不到的事情迅速向他襲來。直到某日,他便成了影響深遠的超級戰士蜘蛛俠。而城市內也出現了兇惡的蜥蜴人,彼得不平凡的人生就此展開……
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